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使用氣相色譜儀會(huì)遇到的問(wèn)題及方法

更新時(shí)間:2022-06-02      點(diǎn)擊次數(shù):2353
  我們?cè)谑褂脷庀嗌V儀會(huì)遇到哪些問(wèn)題? 問(wèn)題1:為什么有些峰出現(xiàn)拖尾?
 
  答:①這可能是由于進(jìn)樣口或色譜柱不干凈,或色譜柱切割不正確。冷卻進(jìn)樣口、關(guān)閉氣流并更換或清潔進(jìn)樣口部件,包括進(jìn)樣口襯管和金密封墊。取出色譜柱。切掉一段色譜柱以清除不揮發(fā)性殘留物、隔墊碎屑和密封圈碎片。這段色譜柱的長(zhǎng)度可以是1英寸到1米,如果需要的話,可以更長(zhǎng)。使用正確的切割工具來(lái)切割色譜柱。如果切割不好,則可能導(dǎo)致樣品吸收。使用黃銅刷子或氧化鋁粉末等軟質(zhì)研磨劑擦洗進(jìn)樣口鋼質(zhì)內(nèi)壁。在重新安裝其他部件前,要確保已將進(jìn)樣口清洗干凈。對(duì)于5890,卸下分流出口管路并用溶劑清洗是比較好的方式。
 
  ②在不分流方式下進(jìn)行分析時(shí),不分流時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致拖尾。通常時(shí)間應(yīng)在0.5至1分鐘范圍內(nèi)。
 
 ?、畚创祾?死)體積也可能導(dǎo)致拖尾。確保在進(jìn)樣器和檢測(cè)器中色譜柱安裝正確。
 
  ④如果考慮色譜柱部分流失,則可以使用色譜柱前的保留間隙(制備色譜柱)。如果沒(méi)有降低色譜柱效率,則可以將其切割掉或更換掉,并可延長(zhǎng)色譜柱的壽命。但要注意保留間隙和分析色譜柱的連接可能引起泄漏和樣品吸收。
 
  問(wèn)題2:如何改善峰形?(前伸峰、拖尾峰)
 
  答:前伸峰是由于色譜柱過(guò)載。當(dāng)一種或多種化合物的進(jìn)樣量超過(guò)色譜柱固定相容量時(shí),可能發(fā)生這種情況。液相膜越薄,色譜柱中保留的每種化合物就越少。這涉及到進(jìn)樣體積和進(jìn)樣中每個(gè)峰的化合物濃度。通過(guò)減少進(jìn)樣量、分流樣品或進(jìn)樣濃度較低的樣品,可減小進(jìn)樣體積。
 
  問(wèn)題3:什么原因?qū)е路灞仍瓉?lái)大,而且出現(xiàn)的早?
 
  答:過(guò)快、過(guò)大的峰通常是由于從分流口和隔墊吹掃口排出的載氣減少,而更多的進(jìn)入色譜柱;因此增加柱頭壓力,可降低分流比。檢查分流出品的氣體流量,如需調(diào)整分流比則對(duì)調(diào)整此流量。如果問(wèn)題依然存在,可卸下并清潔分流口。這個(gè)問(wèn)題也可能由于柱頭壓調(diào)節(jié)閥有問(wèn)題而引起。
 
  問(wèn)題4:何時(shí)需更換隔墊或襯管?
 
  答:通常比較好的隔墊至少能保證100次進(jìn)樣不發(fā)生問(wèn)題。當(dāng)色譜特征說(shuō)明襯管有問(wèn)題時(shí),需要更換襯管。影響隔墊壽命的因素有注射器尺寸、進(jìn)樣口溫度和壓力,當(dāng)然受壓力影響的程度比較小。影響襯管壽命的因素通常是樣品的清潔度。應(yīng)該根據(jù)儀器維護(hù)歷史記錄來(lái)選擇色譜需要的特定程序。
 
  問(wèn)題5:隨著進(jìn)樣室溫度升高,對(duì)分析物分解有影響嗎?
 
  答:如果化合物熱穩(wěn)定性差,分析物分解可能會(huì)帶來(lái)一些問(wèn)題。這在制藥工業(yè)中比較常見(jiàn)。如果藥物或中間體熱分解溫度低于進(jìn)樣口溫度,則分析結(jié)果中將出現(xiàn)特殊的峰或與目標(biāo)分析物發(fā)生反應(yīng)。
 
  問(wèn)題6:排除色譜柱流失問(wèn)題的*佳方法是什么?
 
  答:診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的*佳方法是**次在方法條件下安裝色譜柱時(shí),做一次空白色譜圖,然后將*近的運(yùn)行和空白運(yùn)行色譜圖對(duì)比。如果在空白運(yùn)行中產(chǎn)生了很多峰,則色譜柱性能改變,這可能是由于載氣中含有氧氣,也可能是由于樣品殘留。如果有GC-MS,則低極性色譜柱的典型流失離子(例如DB/HP-1或5)質(zhì)/荷比m/z將為207、73、281、355等,大多數(shù)為環(huán)硅氧烷。
 
  問(wèn)題7:如何得知分流/不分流進(jìn)樣口的進(jìn)樣體積不超過(guò)進(jìn)樣口襯管反應(yīng)室的容積?
 
  答:如果不是多次重復(fù)進(jìn)樣引起精度問(wèn)題,則不會(huì)經(jīng)常發(fā)生這個(gè)問(wèn)題。精度問(wèn)題經(jīng)常是由于不合適的進(jìn)樣體積引起。因?yàn)榉至鬟M(jìn)樣的進(jìn)樣口流速比較高,樣品進(jìn)出進(jìn)樣口比不分流快得多。同樣地,由于溶劑沒(méi)有時(shí)間擴(kuò)散到襯管外,因此分流模式進(jìn)樣體積要求沒(méi)有那么嚴(yán)格。實(shí)際上,1微升是比較合適的,由于降低分流比對(duì)增大峰面積比增加進(jìn)樣量更有效。然而,不分流進(jìn)樣要求要嚴(yán)格的多,建議使用蒸汽體積計(jì)算器估算*終的擴(kuò)散體積。
 
  問(wèn)題8:排除色譜柱流失問(wèn)題的*佳方法是什么?
 
  答:診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的*佳方法是**次在方法條件下安裝色譜柱時(shí),做一次空白色譜圖,然后將*近的運(yùn)行和空白運(yùn)行色譜圖對(duì)比。如果在空白運(yùn)行中產(chǎn)生了很多峰,則色譜柱性能改變,這可能是由于載氣中含有氧氣,也可能是由于樣品殘留。如果有GC-MS,則低極性色譜柱的典型流失離子(例如DB/HP-1或5)質(zhì)/荷比m/z將為207、73、281、355等,大多數(shù)為環(huán)硅氧烷。
 
  問(wèn)題9:色譜分析運(yùn)行時(shí),標(biāo)樣和樣品的峰均隨時(shí)間加寬,這正常嗎?
 
  答:如果保留時(shí)間沒(méi)有很大區(qū)別,只是加寬的峰拖尾,可能表明有活化點(diǎn)。如果加寬的峰是對(duì)稱的,可能是由于正常的色譜柱“損耗和流失”。如果峰前伸,說(shuō)明色譜柱過(guò)載。
 
  問(wèn)題10:為什么在空白運(yùn)行中出現(xiàn)了我的樣品組分峰?
 
  答:有可能是由于樣品制備或系統(tǒng)清潔問(wèn)題。嘗試在樣品和空白樣品制備中使用新溶劑,并在樣品清洗瓶中裝上新溶劑。嘗試使用新的注射器和隔墊。取出并清洗分流出口管路。在未進(jìn)樣情況下運(yùn)行以觀察僅加熱色譜柱有無(wú)峰出現(xiàn)。
 
  問(wèn)題10:什么原因?qū)е禄€不穩(wěn)和干擾?
 
  答:1.進(jìn)樣針受污染。清洗進(jìn)樣針;做一濃縮試驗(yàn),載氣線路可能也要清洗。
 
  2.色譜柱受污染。烘焙色譜柱,限定時(shí)間1-2h。
 
  3.檢測(cè)器不平衡。檢測(cè)器一般需要24h才能得到平衡。
 
  4.在程序升溫的時(shí)候改變載氣流速(在很多情況下為正?,F(xiàn)象)。
 
  問(wèn)題11:什么原因?qū)е逻^(guò)多的基線噪音?
 
  答:1.進(jìn)樣針受污染。清洗進(jìn)樣針;做一濃縮試驗(yàn),載氣線路可能也要清洗。
 
  2.色譜柱受污染。烘焙色譜柱,限定時(shí)間1-2h。
 
  3.檢測(cè)器不平衡。清洗檢測(cè)器,通常噪音不是突然增大而是逐漸產(chǎn)生。
 
  4.污染或載氣質(zhì)量降低。使用高質(zhì)量的載氣或檢查氣體是否泄露。一般在換載氣鋼瓶的時(shí)候會(huì)突然發(fā)生。
 
  5.柱子安裝太過(guò)。可重新安裝。
 
  6.載氣流速不合適。重新設(shè)定流速。
 
  7.與MS、ECD、TCD聯(lián)用時(shí)發(fā)生漏洞,查找并消除漏洞即可。
 
  8.檢測(cè)器的燈或電子倍增管老化。
 
  問(wèn)題12:什么原因?qū)е路逍胃淖儯?/strong>
 
  答:1.檢測(cè)器響應(yīng)改變。檢查氣體流速、溫度和設(shè)置。
 
  2.樣品的濃度改變。檢查并檢驗(yàn)樣品的濃度,樣品的蒸發(fā)或成分的改變都可能引起。
 
  3.色譜柱受污染。
 
  問(wèn)題13:如果分離度下降,如何處理?
 
  1.柱溫不同。檢查柱溫。
 
  2.不同的色譜柱的維數(shù)和相位。核實(shí)色譜柱的特性。
 
  3.改變載氣流速。
 
  4.色譜柱受污染,應(yīng)用溶媒清洗柱子。
 
  5.進(jìn)樣器的改變。檢查進(jìn)樣器的設(shè)置。
 
  6.樣品的濃度或溶解能力的改變。試用一個(gè)不同的濃度。
 
  問(wèn)題14:如果出現(xiàn)分裂峰,如何處理?
 
  1.試著改變一下進(jìn)樣方法。
 
  2.改變?nèi)苊?,使其成為單一的溶媒?br /> 
  3.重新安裝色譜柱。
 
  4.減小進(jìn)樣溫度。
 
  問(wèn)題15:如果懷疑進(jìn)樣器或載氣被污染了,應(yīng)采用何種檢測(cè)?
 
  1.GC在40-50℃保持8小時(shí)或8小時(shí)以上。
 
  2.運(yùn)行一個(gè)空白分析(開(kāi)啟GC,但不進(jìn)樣)。
 
  3.收集空白分析的色譜圖。
 
  4.**個(gè)空白分析完成以后立即開(kāi)始第二次,二者間隔時(shí)間不要超過(guò)5min。
 
  5.收集第二次空白分析的色譜圖,并與**次的圖譜進(jìn)行比較。
 
  6.假如在**次時(shí),峰圖包含了大量的色譜峰,而且基線不穩(wěn)定,那就暗示了毛細(xì)管柱被污染了(進(jìn)樣器或載氣被污染)。
 
  7.假如兩次色譜峰圖都包含少數(shù)的峰或基線的微小漂移,那就可以假定進(jìn)樣器或載氣是比較干凈的。假如
 
  8.假如兩次色譜峰圖都包含重大數(shù)量的噪音和(或)基線漂移,那通常也就表明了進(jìn)樣器或載氣被污染了。
 
  問(wèn)題16:保護(hù)柱應(yīng)為多長(zhǎng)?
 
  比較有代表性的保護(hù)柱柱長(zhǎng)為0.5-10m。雖然沒(méi)有確定的長(zhǎng)度適合所有的樣品,但是以下一些建議也可以參考。假如樣品相對(duì)來(lái)說(shuō)比較純凈,溶質(zhì)為極性,保護(hù)柱應(yīng)該在0.5-1.0m之間;若樣品相對(duì)來(lái)說(shuō)不純凈,保護(hù)柱應(yīng)該適當(dāng)長(zhǎng)些。5-10m長(zhǎng)的主要是為了維護(hù)單一系統(tǒng)。長(zhǎng)保護(hù)柱允許使用者減去大約1m而代替整個(gè)保護(hù)柱安裝。
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